Celle-til-celle heterogenitet er et vanlig fenomen observert i en rekke cellulære prosesser, inkludert: stamcelledifferensiering, utvikling, kreft, farmasøytisk effekt og immunrespons. Tradisjonelle måter å studere enkeltcelleadferd, som flowcytometri og immunocytokjemi, gir ofte tvetydige resultater, og unnlater å markere unike og mangfoldige atferd innenfor komplekse cellepopulasjoner. Nylig utviklet forskere ved Uc Berkeley en ny single-cell Western Blot (scWestern) metode som er i stand til å måle celle-til-celle heterogenitet. Denne metoden gir bedre diskriminering mellom on-target og off-target signaler, skyldes delvis til protein separasjon trinn før antistoff sondering.
scWestern Protocol
Single-celle Western analyse benytter et mikroskop lysbilde belagt med en tynn fotoaktive polyakrylamid (PA) gel micropatterned med en rekke 6720 microwells.
Utnytte protokollen beskrevet ovenfor, forskere studerte MAPK signaldynamikk innenfor enkelt neuron stamceller. Ved probing fosforylert ERK1 / 2 (pERK) ble to proteiner av forskjellige størrelser detektert. Det større proteinet, antatt å være pERK5, har blitt rapportert å kryssreagere med pERK1 / 2 antistoff på grunn av sekvenshomologi. ScWestern blotting-metoden tillot forskere å hypotese dette ekstra proteinbåndet skyldtes off-target antistoff probing siden (1) betydelig celle-til-celle variabilitet eksisterte for pERK5-båndet og (2) pERK og ERK antistofffluorescenssignaler korrelerte ikke. Tradisjonelle ICC-og FC-analyser unnlater ofte å diskriminere feilaktige proteinsignaler, noe som gjør scWestern-blotting til en kraftig metode for å fremme analysespesifisitet og markere ulike cellulære responser på en rekke stimuli.
 |
Hughes et al. (Juli 2014). Single-celle western blotting.Natur Metoder.11(7), 749-755. |
For å lette din forskning, GenScript tilbyr Western Blot Garantert polyklonale og monoklonale antistoff produksjonstjenester. Våre tilpassede antistoffproduksjonspakker Med MonoExpress™ og PolyExpress™ er dine one-stop-løsninger for høyspesifikke / høyaffinitetsantistoffer designet for å møte dine analysebehov. PolyExpress™ Premium (pAb) & monoexpress™ Gull (mAb) tilpassede antistoffpakker bruker rekombinante proteinantigener, ideelt for studier der gjenkjenning av overflateepitoper av det opprinnelige proteinet er kritisk.
|
du gir
|
protein sekvens
|
protein sekvens
|
|---|---|---|
|
vi leverer
|
1-5mg affinitet renset pAb
|
Skjerm 10 og velg opptil 5 hybridomer; motta 2 mg renset Ab
|
|
Garanti
|
Positive Western Blot resultater;
ELISA titer ≥ 1:64,000 |
Minst 1 klone Western Blot positiv; ELISA titer ≥ 1:64,000
|
|
Turnaround tid
|
12 uker – minst 4 uker raskere enn våre konkurrenter!
|
11 uker til første levering – minst 3 uker raskere enn noen annen leverandør!
|
Kom i gang i dag!
 |
 |
GenScript forstår det store mangfoldet i forskningsemner og tilbyr en rekke one-stop-løsninger som passer dine behov.
- Kort tid og trenger et tilpasset antistoff mot et peptidantigen? PolyExpress™ Gull, Sølv, & Grunnleggende tilpassede pab-servicepakker GARANTERER 45 dager fra bestilling til levering.
- våre fosfo-spesifikke antistofftjenester gjør det enkelt å studere signalveier og vise < 10% kryssreaktivitet med ikke-fosfopeptid.
- Trenger du oppskalering av produksjonstjenester? GenScript tilbyr både in vivo ascites og in vitro roller flaske produksjon.
- Leter du etter noe mer unikt? Sjekk Ut Våre Spesialiserte Antistoff Tjenester som spenner fra: Ab drug development, Ab modifikasjon & rensing til immunoassay utvikling og stabil celle linje tjenester.