heterogenita mezi buňkami je běžným jevem pozorovaným v různých buněčných procesech, včetně: diferenciace kmenových buněk, vývoj, rakovina, farmaceutická účinnost a imunitní odpověď. Tradiční způsoby studia chování jednotlivých buněk, jako je průtoková cytometrie a imunocytochemie, často dávají nejednoznačné výsledky, nedaří se zvýraznit jedinečné a rozmanité chování v komplexních buněčných populacích. Nedávno vědci z UC Berkeley vyvinuli novou jednobuněčnou metodu Western Blot (scWestern) schopnou měřit heterogenitu buněk k buňkám. Tato metoda umožňuje lepší diskriminaci mezi signály na cíl a mimo cíl, částečně kvůli kroku separace proteinů před vyšetřením protilátek.
scWestern Protocol
jednobuněčná Západní analýza využívá mikroskopické sklíčko potažené tenkým fotoaktivním polyakrylamidovým (PA) gelem mikropatterovaným s řadou 6 720 mikroobuněk.
využití protokolu popsaného výše, vědci studovali MAPK signalizační dynamiku v rámci jednotlivých neuronových kmenových buněk. Při vyšetření fosforylovaného ERK1 / 2 (pERK) byly detekovány dva proteiny různých velikostí. Větší protein, předpokládaný jako pERK5, byl hlášen zkříženou reakcí s protilátkou pERK1/2 v důsledku sekvenční homologie. Metoda scwestern blotting umožnila vědcům předpokládat, že tento extra proteinový pás byl způsoben vyšetřením protilátek mimo cíl, protože (1) podstatná variabilita buněk mezi buňkami existovala pro pásmo pERK5 a (2) fluorescenční signály protilátek pERK a ERK nekorelovaly. Tradiční testy ICC a FC často nediskriminují chybné proteinové signály, díky čemuž je scWestern blotting účinnou metodou pro urychlení specifičnosti testu a zvýraznění různých buněčných reakcí na různé podněty.
 |
Hughes a kol. (Červenec 2014). Jednobuněčné západní blotování.Přírodní Metody.11(7), 749-755. |
pro usnadnění vašeho výzkumu nabízí GenScript služby produkce polyklonálních a monoklonálních protilátek zaručené Western Blot. Naše MonoExpress™ a PolyExpress™ vlastní protilátky výrobní balíčky jsou vaše one-stop řešení pro vysoce specificitu / vysoce afinitní protilátky navržen tak, aby vyhovoval vašim potřebám testu. PolyExpress™ Premium (pAb) & monoexpress™ Gold (mAb) vlastní protilátkové balíčky používají rekombinantní proteinové antigeny, ideální pro studie, kde je kritické rozpoznání povrchových epitopů nativního proteinu.
|
poskytujete
|
proteinová sekvence
|
proteinová sekvence
|
|---|---|---|
|
dodáváme
|
1-5mg afinitně purifikovaná pAb
|
obrazovka 10 a vyberte až 5 hybridomů; příjem 2 mg purifikovaného Ab
|
|
záruka
|
pozitivní výsledky Western Blot;
titr ELISA ≥ 1:64,000 |
alespoň 1 klon Western Blot pozitivní; titr ELISA≥ 1:64,000
|
|
Doba obratu
|
12 týdny – alespoň 4 týdny rychleji než naši konkurenti!
|
11 týdny do prvního dodání-alespoň 3 týdny rychleji než kterýkoli jiný prodejce!
|
Začněte ještě dnes!
 |
 |
GenScript chápe velkou rozmanitost výzkumných témat a nabízí řadu jednorázových řešení, která odpovídají vašim potřebám.
- krátký čas a potřebujete vlastní protilátku proti peptidovému antigenu? PolyExpress™ Gold, Silver, & základní zakázkové balíčky služeb PAB zaručují 45 dní od objednávky po dodání.
- naše služby fosfo-specifických protilátek činí studium signálních drah hračkou a vykazují <10% zkříženou reaktivitu s nefosfo peptidem.
- potřebujete rozšířit výrobní služby? GenScript nabízí Jak in vivo ascites, tak in vitro výrobu válečkových lahví.
- hledáte něco jedinečnějšího? Podívejte se na naše specializované služby protilátek od: Ab vývoj léků, AB modifikace & purifikace na vývoj imunoanalýzy a stabilní služby buněčné linie.